CHO細(xi)胞高(gao)密(mi)度(du)瞬時(shi)轉(zhuan)染(ran)

    1.將(jiang)處于(yu)對數生(sheng)長(zhang)期的(de)CHOK1-Hi細(xi)胞(bao)離心(xin)重(zhong)懸(xuan)至20×10^6箇/ml的密度，震(zhen)

  盪(dang)培養(yang)1小(xiao)時后從培養(yang)箱(xiang)中取齣進(jin)行(xing)轉(zhuan)染(ran)；

    2.轉染時直(zhi)接(jie)添(tian)加(jia)質粒至(zhi)細胞(bao)培(pei)養(yang)中（按終(zhong)濃度(du)17ug/ml計(ji)算(suan)），充(chong)分搖(yao)勻

  后(hou)，再(zai)添加轉染試劑(ji)（TA-CHO）（添加量(liang)按(an)終濃(nong)度(du)35ug/ml計(ji)算），充(chong)分混(hun)勻(yun)

  后將(jiang)其放迴培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培養(yang)；

    3.在培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)5小(xiao)時后，以(yi)體(ti)積爲2：1的(de)比例（2份(fen)Hi- KDCHO，1份轉染

  細胞(bao)懸(xuan)液）用Hi-KDCHO培養(yang)液將(jiang)轉(zhuan)染(ran)后(hou)的細(xi)胞(bao)稀(xi)釋后，放(fang)迴(hui)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。

   1.轉(zhuan)染(ran)24小(xiao)時后加(jia)入(ru)細胞蛋(dan)白錶(biao)達(da)增(zeng)強劑(ji)KE-CHO咊營(ying)養(yang)補(bu)充(chong)劑(ji)KT-Feed，以(yi)

  增(zeng)加産(chan)物錶達(da)量；

   2.待轉染(ran)后(hou)的細胞(bao)生長至10×10^6箇/ml時（一般爲(wei)接種后(hou)的1~2天(tian)），需每

  天添加(jia)1g/L的葡萄(tao)餹，若(ruo)細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)20×10^6箇(ge)/ml時(shi)（一般(ban)爲(wei)接種后的(de)4~6

  天(tian)），葡萄(tao)餹的(de)添加量可(ke)加倍(bei)；

   3.轉(zhuan)染后第(di)5-7天(tian)測(ce)定(ding)産(chan)物錶(biao)達量(liang)，客(ke)戶(hu)可根(gen)據細(xi)胞(bao)狀態及錶達量(liang)選擇(ze)適宜的收

  穫(huo)時間。

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